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奧林巴斯CKX53顯微鏡觀察大尺寸細(xì)胞方法
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長(zhǎng)恒榮創(chuàng)

時(shí)間 : 2025-02-22 11:17 瀏覽量 : 53

使用奧林巴斯 CKX53 顯微鏡觀察大尺寸細(xì)胞,可參考以下方法:


奧林巴斯CKX53顯微鏡前期準(zhǔn)備

樣本制備:將待觀察的大尺寸細(xì)胞制作成合適的裝片。如果是培養(yǎng)的細(xì)胞,可將細(xì)胞培養(yǎng)在蓋玻片上,待細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)良好后,用 PBS 等緩沖液輕輕沖洗,去除雜質(zhì),然后根據(jù)需要進(jìn)行固定、染色等操作。若為組織樣本中的大尺寸細(xì)胞,需先將組織進(jìn)行切片,切片厚度一般在 5-10 微米左右較為合適,然后進(jìn)行脫蠟、水化及染色等處理,以便更好地觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

試劑準(zhǔn)備:準(zhǔn)備好觀察所需的試劑,如用于固定細(xì)胞的多聚甲醛、用于染色的蘇木精 - 伊紅(HE)染液、DAPI 染液等,以及用于封片的中性樹膠等。

顯微鏡調(diào)試:打開奧林巴斯 CKX53 顯微鏡電源,調(diào)節(jié)光源強(qiáng)度,使其適中。將顯微鏡的物鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)至低倍物鏡(如 2x 或 4x)處,調(diào)節(jié)焦距旋鈕,使載物臺(tái)上升到合適位置,準(zhǔn)備放置樣本。


奧林巴斯CKX53顯微鏡觀察步驟

低倍鏡觀察:將制備好的樣本裝片放在載物臺(tái)上,用壓片夾固定好。通過目鏡觀察,同時(shí)調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋,使載物臺(tái)緩慢下降,直到在視野中看到清晰的細(xì)胞圖像。使用低倍鏡可以觀察到細(xì)胞的整體形態(tài)和分布情況,找到需要進(jìn)一步觀察的大尺寸細(xì)胞。移動(dòng)載物臺(tái),將目標(biāo)細(xì)胞移至視野中央。

中倍鏡觀察:將物鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)至中倍物鏡(如 10x 或 20x),此時(shí)需重新調(diào)節(jié)焦距,可先使用粗準(zhǔn)焦螺旋大致找到細(xì)胞圖像,再用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行微調(diào),使圖像更加清晰。在中倍鏡下可以更清楚地觀察到細(xì)胞的細(xì)節(jié)結(jié)構(gòu),如細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)的大致形態(tài)等。進(jìn)一步調(diào)整光源亮度和對(duì)比度,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)更加清晰可見。

高倍鏡觀察:如果需要觀察更細(xì)微的結(jié)構(gòu),可將物鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)至高倍物鏡(如 40x)。由于高倍物鏡的工作距離較短,在轉(zhuǎn)換物鏡時(shí)要特別小心,避免物鏡碰到樣本裝片。轉(zhuǎn)換后,僅使用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行微調(diào),以獲得清晰的圖像。在高倍鏡下可以觀察到細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器、細(xì)胞膜的細(xì)節(jié)等結(jié)構(gòu)。


奧林巴斯CKX53顯微鏡觀察記錄

繪圖記錄:可以準(zhǔn)備好繪圖工具,在觀察過程中,根據(jù)看到的細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),用鉛筆在紙上進(jìn)行繪圖記錄,標(biāo)注出細(xì)胞的各個(gè)結(jié)構(gòu)和特征。

拍照記錄:奧林巴斯 CKX53 顯微鏡一般可配備成像系統(tǒng),可通過成像軟件進(jìn)行拍照記錄。在拍照時(shí),要調(diào)整好圖像的亮度、對(duì)比度、色彩等參數(shù),確保拍攝到的圖像清晰、準(zhǔn)確地反映細(xì)胞的真實(shí)形態(tài)。


奧林巴斯CKX53顯微鏡注意事項(xiàng)

保持載物臺(tái)和鏡頭清潔:在觀察過程中,要避免樣本液體污染載物臺(tái)和物鏡鏡頭。如果有液體濺出,應(yīng)及時(shí)用干凈的擦鏡紙擦拭干凈。

避免過度調(diào)節(jié):在調(diào)節(jié)焦距和光源等參數(shù)時(shí),要注意不要過度調(diào)節(jié),以免損壞顯微鏡或影響觀察效果。

注意物鏡使用順序:一般按照從低倍鏡到高倍鏡的順序進(jìn)行觀察,這樣可以更容易地找到目標(biāo)細(xì)胞,并避免在高倍鏡下因視野過小而難以找到細(xì)胞。

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